ELISA proba: zein da printzipioa?

ELISA proba: zein da printzipioa?

Definizioa: zer da ELISA proba?

Lotutako entzima immunoabsorption assay teknika - Ingelesez Enzyme-Linked Immuno Assay - edo ELISA proba lagin biologiko batean molekulak hautematea edo aztertzea ahalbidetzen duen proba immunologikoa da. Suediako bi zientzialarik, Peter Perlmannek eta Eva Engvall-ek kontzeptualizatu eta garatu zuten Stockholmeko Unibertsitatean 1971n.

ELISA metodoaren bidez aztertutako molekulak, oro har, proteinak dira. Lagin moten artean, material biologiko fluidoak (plasma, seruma, gernua, izerdia), kultura zelularreko hedabideak edo proteina birkonbinatzailea dira, konbinazio genetikoarekin konbinazio genetikoarekin aldatutako materiala genetikoa den zelula batek sortutako proteina.

ELISA proba batez ere immunologian erabiltzen da lagin batean proteinak, antigorputzak edo antigenoak daudela detektatzeko eta / edo neurtzeko. Proba serologiko honek bereziki birusaren kutsaduraren ondorioz gorputzak sortutako antigorputzak antzematen ditu.

Gaixotasun infekziosoen ELISA probaren oinarria

Gaixotasun infekziosoen diagnostikorako antigorputzak erabiltzea metodo zehatz eta azkarra da. ELISA teknika teknika inmuno-entzimatikoa da, lagin biologiko batetik abiatuta, antigeno baten –organismo biziak arrotzat jotzen duen gorputza– eta entzima markatzaile batek sortutako kolore erreakzioa erabiliz antigorputzaren arteko erreakzioak ikustea ahalbidetzen du. orokorrean fosfatasa eta peroxidasa alkalinoa - aurrez antigorputzari lotuta. Kolore erreakzioak bakterio isolatuaren identifikazioa edo nahi den birusa egotea baieztatzen du eta kolorearen intentsitateak emandako laginaren antigeno edo antigorputzen kantitatea adierazten du.

ELISA proba mota desberdinak

ELISA proba mota lau daude:

  • ELISA zuzena, antigorputzak detektatu edo neurtzea ahalbidetzen du. Antigorputz primarioa bakarrik erabiltzen du;
  • ELISA zeharkakoa, gehien erabiltzen denak, antigorputzak detektatzea edo aztertzea ere ahalbidetzen du. ELISA zuzenak baino sentsibilitate hobea ematen dion bigarren antigorputz bat erabiltzen du;
  • ELISA lehiaketan, antigenoen dosia ahalbidetzen du. Loturak lortzeko lehiak sortuta, ez du entzimarik erabiltzen;
  • ELISA «ogitartekoan», antigenoen dosia ahalbidetzen du. Teknika hau ikerketan erabili ohi da.

ELISA proba erabiliz

ELISA proba honetarako erabiltzen da:

  • Aurkitu eta neurtu gaixotasun infekziosoak diagnostikatzeko serologian antigorputzak: birologia, parasitologia, bakteriologia eta abar;
  • Dosi proteinak kontzentrazio baxuetan: proteina plasma batzuen dosi espezifikoak (E immunoglobulina (IgE), ferritina, proteina hormonak, etab.), Tumore markatzaileak, etab.
  • Dosi molekula txikiak: hormona esteroideak, tiroideo hormonak, drogak ...

Kasu ohikoenak: Covid-19, Dengue, GIB, Lyme, alergiak, haurdunaldia

ELISA proba bereziki gaixotasun infekziosoen diagnostikoa egiteko erabiltzen da:

Sexu bidezko gaixotasunak (ETS)

Hepatitisa, sifilisa, klamidia eta GIB barne. Osasun agintariek gomendatuta, HIESaren azterketa proba nagusia da: GIBaren aurkako antigorputzak eta p24 antigenoa da infekzioa gertatu eta sei astera.

Eskualde mailako edo gaixotasun endemikoak

Sukar horia, Marburg birusaren gaixotasuna (MVM), Ladengue, Lyme gaixotasuna, Chikungunya, Rift Valley sukarra, Ebola, Lassa sukarra, etab.

Covid-19

Sintomak hasi eta 2 edo 3 aste baino gehiagora burutu ahal izateko, ELISA probak SARS-CoV-2 antigorputzen presentzia identifikatzea ahalbidetzen du ordu bete baino gutxiagotan.

Jaio aurreko infekzioak eragiten dituzten patogeno birikoak

Toxoplasmosia, errubeola, zitomegalobirusa, herpes simplexa adibidez.

Beste kasu batzuk

Baina detektatzeko aplikazioak ere aurkitu ditu:

  • Haurdunaldiak;
  • Gaixotasun autoimmuneak;
  • Elikagaien alergenoak: E (IgE) immunoglobulina osoen zehaztapen kuantitatiboak alergien ebaluazioan eta tratamenduan laguntzen du;
  • Asaldura hormonalak;
  • Tumore markatzaileak;
  • Landare birusak;
  • Eta askoz gehiago

Covid-19 probaren fidagarritasuna

SARS-CoV-2 antigorputzen detekzioaren barruan, Institut Pasteurrek, CNRSk, Insermek eta Pariseko Unibertsitateak 2020ko abuztuan egindako ikerketa pilotu batek ELISA testaren fidagarritasuna berresten du: ELISA probek erabiltzen dute SARS-CoV-2 (N ELISA) N proteina osoa edo birusaren pikaren (S) zelulaz kanpoko domeinua xede antigeno gisa. Teknika horri esker, antigorputzak kasuen% 90ean baino gehiagotan identifikatzea ahalbidetuko da,% 1eko faltsutasun-tasa oso baxua izanik.

ELISA probaren prezioa eta itzulketa

Medikuntzako errezeta analisiko laborategietan eginik, Elisa probak 10 euro inguru kostatzen dira eta Osasun Aseguruak% 100ean itzultzen ditu.

Doako informazioa, baheketa eta diagnostiko zentroetan (CeGIDD) egiten dira, doakoak izan daitezke GIB eta SARS-CoV-2rako.

Utzi erantzun bat